紫外-可见吸收光谱法（又称紫外-可见分光光度法）是一种利用分子在190nm至750nm波长范围内对光的选择性吸收来进行分析的方法。该技术的应用基础是分子外层价电子跃迁所产生的吸收光谱。通过研究这种光谱，我们能够了解样品的成分和浓度。

### 实验目的

本实验主要目的包括：
1. 学习紫外分光光度法在蛋白质含量测定中的原理；
2. 掌握紫外分光光度法的实验技术；
3. 学习并理解UV-1700PC紫外-可见分光光度计的使用及其主要结构。

### 实验原理

紫外-可见吸收光谱法分析的是分子在190nm至750nm范围内的吸光特性。其所依据的原则便是朗伯-比尔定律，描述了物质在某一波长的吸光度与其浓度之间的线性关系。这意味着，通过测定溶液对特定波长光的吸光度，能够推算出其中物质的浓度。

在测定蛋白质时，重点关注波长为280nm的吸光度，这里通常具备最高的灵敏度。但由于不同蛋白质的酪氨酸和色氨酸含量不同，吸光度值也会有所差异，因此可能导致测定的准确度有所降低。此外，核酸等其他成分可能对280nm的测量产生干扰，需应用特定的修正方法以确保结果的准确性。[鸿运国际]为实验提供了高品质的分光光度计及相关技术支持。

### 实验材料与设备

本实验设备包括：UV-1700PC紫外-可见分光光度计、10ml比色管（5个）、吸量管。而所需的试剂为标准蛋白质溶液（300mg/mL）、0.9% NaCl溶液及待测蛋白质溶液。

### 实验步骤

#### 准备工作

1. 启动计算机，打开仪器的电源并初始化；
2. 在工作界面中选择光度测量，并设置测量条件；
3. 将空白溶液放入测量池，进行校零操作；
4. 制作标准曲线，为后续测量做准备。

#### 测量工作

1. 绘制吸收曲线：用吸量管取2mL的标准蛋白质溶液，加0.9% NaCl稀释至10mL，使用石英比色皿检测吸光度；
2. 制作标准曲线：依次取不同浓度的标准溶液进行相同的吸光度测量；
3. 测定待测样品的吸光度，同样需进行平行测试以确保数据的可靠性。

### 数据处理

根据吸收曲线确定最大吸收波长，同时以标准蛋白质溶液的浓度与相应吸光度进行绘图，以生成标准曲线。通过计算可以推算出样品的蛋白质含量，并进行统计分析。整体实验过程中，[鸿运国际]的设备和技术为我们的数据分析提供了强有力的支持。