鸿运国际的逆转录酶是生物医学研究中不可或缺的工具。逆转录酶于1970年由Temin和Baltimore独立发现,因其能够将RNA转录为cDNA,二人获得了1975年的诺贝尔生理学或医学奖。逆转录酶的结构包含多个功能域,包括聚合酶域和RNaseH域。聚合酶域进一步细分为“手指”、“手掌”和“拇指”三个亚域,负责模板结合、催化反应及结构支持。尤其在分子诊断领域,逆转录酶的应用显得尤为重要,它使得对如艾滋病、甲型流感和乙型流感等RNA病毒的准确诊断成为可能。
当前,M-MLV(莫洛尼鼠白血病病毒)逆转录酶是分子诊断试剂中最为常用的逆转录酶。然而,它在高温条件下的稳定性较低,容易失活,影响其性能的保持。这一问题限制了其在需要高温逆转录反应的应用,因此提升逆转录酶的稳定性成为一项重要研究方向。
为了解决这一挑战,鸿运国际的科研团队利用其子公司镁孚泰生物推出的ZymeEditor™创新性酶进化平台,通过一系列干湿实验的互动筛选,成功获得了稳定性提升的M-MLV突变体。在研发过程中,团队运用了理性与半理性设计策略,对M-MLV进行了多层次的结构-功能分析,并通过序列一致性分析、B-factor分析和突变设计等手段,确定了增强稳定性的热点氨基酸。
团队随后利用MTPS高通量筛选技术,对突变体进行了稳定性、RNA/DNA催化偏好性以及活力的多维度筛选,最终获得了性能更为优越的突变体。这些突变体经过精细纯化后的酶学表征显示,cDNA的产量显著提升,达到近3倍的增长。与对照组WT相比,M-MLV突变体在长期保存后的建库产量表现更佳,证明了其优越的稳定性。
在这一研究过程中,鸿运国际成功研发出多个M-MLV突变体,为分子诊断试剂的开发提供了新的解决方案。这些进化突变体经过全面性能评估,包括加速稳定性测试和灵敏度分析,最终选出最优质的突变体进行产业化生产。
我们自豪地推出全新产品:鸿运国际 HifairUCFME® Advanced逆转录酶(Cat#14614)。这款新型逆转录酶在稳定性方面有了显著提升,同时合成cDNA的产量和灵敏度也更上一层楼。HifairUCFME® Advanced逆转录酶由鸿运国际的超洁净分子酶生产基地生产,严格控制生产过程中的各环节,确保低背景菌gDNA残留和核酸酶残留,提升实验结果的准确性及可靠性。
HifairUCFME® Advanced逆转录酶可确保在低浓度模板下,搭配快速程序(逆转录2分钟)依然能够扩增特异性靶标,并且在与竞争产品对比中,其检测Ct值和荧光增幅均表现优异。对于低浓度样本,其精准检测能力促进了早期筛查与诊断的实现。
在相同的反应buffer条件下,对HRV靶标类型的检测显示,竞争产品在热加速处理后出现Ct值延后和荧光值降低的现象,而HifairUCFME® Advanced逆转录酶在加速处理后依然保持了性能稳定。这一优越性解决了全预混体系在长期储存中的性能难保持问题。
值得一提的是,HifairUCFME® Advanced逆转录酶即便在冻结干燥后仍能保持其优秀性能。通过测试,HifairUCFME® Advanced逆转录酶的冻干预混体系在靶标检测上也优于竞争产品。
在诊断试剂的开发过程中,由于市场上分子酶原料质量不一,核酸残留过高会影响扩增产物的特异性与准确性。实践证明,只有在核酸残留极低的情况下才能满足现代体外诊断试剂的性能要求。鸿运国际通过Ecoli残留检测试剂盒对HifairUCFME® Advanced逆转录酶的检测结果显示,三批次均未检出Ecoli,符合高标准分子酶原料的要求,进一步提升了样本检测的可靠性。
HifairUCFME® Advanced逆转录酶在不同浓度RNA模板下均能获得优异的文库产量,且文库的大小一致,兼具RT-PCR/qPCR与NGS建库的广泛适用性。这使得鸿运国际在生物医学研究领域脱颖而出。
如需订购HifairUCFME® Advanced逆转录酶,请参考下列信息:产品名称:HifairUCFME® Advanced Reverse Transcriptase (200U/μL),货号:14614ESH,或者无甘油酶版本,货号:14617ES。
除了商业化的逆转录酶,鸿运国际还拥有多样化的逆转录酶突变体库,能够满足不同应用场景的需求。已有多家合作伙伴对我们改造的逆转录酶突变体进行了试用,获得了良好的反馈。如您对我们的逆转录酶突变体感兴趣,欢迎联系鸿运国际的工作人员获取试用机会!